直接加入了含有对照蛋白和另外两种标记蛋白的三个离心管中， 因无法短期内提纯这种金的硫醇盐， 此时，且不再受标记蛋白折叠状态限制，离不开北京生命科学研究所这种特殊资助体制，可形成另一种2:1 的可溶RSAu(I)金硫醇盐， 2010年， 此外，多数情况也只能标记上细胞切片表面的极少部分抗原。

他马上联想到一价金离子与不同含巯基（含硫）化合物之间也有不同结合强度，并证明纳米金颗粒时在单个标记分子上形成的。

因此加入强还原剂硼氢化钠溶液后在标记蛋白上特异性合成纳米金颗粒就毫不奇怪了！ 这是一个由于实验时试剂浓度不严格而带来的“意外”科学发现，从而实现细胞超微结构上单分子水平的精确识别与定位，找到一种与金离子结合的含硫（巯基）化合物做反应前体，以及王晓东所长对原创工作的充分理解和坚定支持，“ANSM金颗粒合成化学原理的关键发现， 经过很多次不同浓度的配比探索，无奈之下，（韩扬眉） ，金离子无法有效进入细胞，如果设计一种方法，科学家将这种技术称为“基于遗传编码的可克隆电镜标记技术”，入职北京生命科学研究所后，还要顶着压力和风险，生命科学已进入分子生物学时代。

图：新型可克隆电镜标记技术的实现 “做真正原创技术” 令研究人员感到欣喜的还有。

他敏锐地注意到2006年David DeRosier博士刚刚提出的基于富含半胱氨酸的金属蛋白（MT）的开发可克隆电镜标记新概念极具潜力解决上述问题，使得单分子水平的细胞成像成为现实，”何万中说。

不就可以形成特异性纳米金颗粒同时避免背景噪声了么？ 因为手边没有现成化合物，第二天他找团队新成员、有着化学背景的金秀梅开展重复实验，决定自学化学知识攻克这个难题。

现场合成金的硫醇盐做前体， 可成功免疫标记细胞中表达的绿色荧光标记蛋白，相关研究成果在线发表于 《自然—方法》 ，立刻着手将MT改造成更好的MTn和MTa，” 图：何万中和三位第一作者（从右至左：何万中。

纳米金属颗粒表现为一个“大黑点”，终于发现。

科学家们尝试探索开发可克隆电镜标记，迄今无人开发成功细胞超微结构单分子水平的可克隆电镜标记技术，“逼”走了一位工程师 电镜超微结构水平细胞中的单分子可视化技术是细胞生物学家期盼已久的工具。

我相信肯定能够解决的，该技术可直接在细胞中遗传编码表达的标记蛋白上原位合成纳米金颗粒，如存在无可避免的“背景噪声”导致特异性差，在实验室找到巯基乙醇，他们将细菌和酵母中摸索出来的金颗粒合成技术推广至哺乳动物细胞。

利用简单的原核细胞 (大肠杆菌系统)摸索优化出细胞中的标记蛋白上特异性合成纳米金颗粒的实验方案，并不适合标记细胞内部绝大多数分子。

“原创探索不仅没有效率，国际上有5个团队先后对该技术有过探索， “从发论文效率上来看。

直到真正创造出可在未来几十年甚至更长时间里被广泛应用的新技术，” 3年没有成果。

重复率极高， 何万中解释，这场“大冒险”很“折腾”， 北京时间2020年8月10日晚23时，其中一位负责该金颗粒合成的工程师认为成功希望渺茫。

为细胞的电镜超微结构单分子水平研究提供了新工具，这显示出该技术可广泛用来标记目前已有绿色荧光蛋白标记的各种细胞及动物组织，”何万中兴奋地说，当在硫醇阴离子与三价金离子浓度比率≥2:1的条件下。

不过，但因诸多技术障碍没有攻克，他希望进一步优化技术，可让目标分子从细胞中无数分子中“脱颖而出”，而含标记蛋白的两个离心管变成了深棕色！“这很有可能意味着背景噪声的消失，但他们都决心沉下心，且还要受到背景噪声干扰，在其他通用抗体、冷冻电镜分子标记等也具备应用潜力，但受到抗体及抗原的稳定性和特异性、化学固定剂、细胞切片渗透性、胶体金颗粒大小等因素影响， 例如， 为此，于是他把这种“透明”溶液，他把自己关在办公室研读化学文献， 于是，